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蛋白印迹(Western Blot)实验中的内参
爱必信(上海)生物科技有限公司   2020-05-22 11:41

蛋白质印迹(WB)用于测量不同条件下特定蛋白的变化。在蛋白质印迹(WB)过程中涉及许多步骤,包括样品制备、电泳、蛋白转移、抗体孵育和信号检测。为了解释蛋白质印迹实验的结果,一个贯穿全过程的内参是必须的。

内参可保证每个泳道中加入了相同量的蛋白样品,不同泳道上的蛋白以相同的效率从凝胶转到膜上,不同泳道上抗体孵育(对于一抗而言,必要的话也包括二抗)、信号检测都是一致的。

内参的信号通常用来对目标蛋白的信号进行标准化。需要强调的是,对照蛋白抗体应该与实验抗体在相同的印迹上进行。

不同的样品制备需要不同的内参。下面总结了针对不同样品制备常用的内参,包括全细胞/胞浆蛋白、线粒体、核蛋白、植物组织和血清样本。


针对不同样品制备常用的内参以及它们的分子量



蛋白质印迹(Western Blot)实验中产品推荐: 

实验步骤  推荐指数  货号  产品名称  规格
样本制备
  abs9228  RIPA (中)  100ml

  abs9229  RIPA (强)  100ml

  abs9230  RIPA (弱)  100ml

  abs9231  RIPA (强,无抑制剂)  100ml

  abs9160  NP-40  100ml

  abs9195  1M Tris-HCl,pH6.8  1L

  abs9201  1M Tris-HCl,pH8.8(更多pH请看官网)  1L

  abs9117  SDS  100ml
  ★★  abs9116  WB/IP 细胞裂解液  100ml
  ★★  abs9239  WB/IP 细胞裂解液(无抑制剂)  100ml
  ★★★★  abs9101  红细胞裂解液  100ml,250ml,500ml

  abs812852  PMSF  50mg,100mg,200mg

  abs816442  Aprotinin 抑肽酶 10mg,25mg,50mg,100mg

  abs817902  Peptatin 胃蛋白酶抑制剂A 10mg,25mg,50mg,100mg

  abs9133  EDTA  100ml

  abs42017684  EGTA  1g,10g

  abs817431  原钒酸盐  100mg,500mg

  abs47014865  β-甘油磷酸盐  10g,25g
  ★★  abs9161  广谱型蛋白酶抑制剂混合物  1ml
  ★★  abs9162  广谱型磷酸酶抑制剂混合物  1ml
蛋白定量  ★★  abs9232  BCA蛋白定量试剂盒  500次,2500次
  ★★  abs9233  增强型BCA 蛋白定量试剂盒  500次
上样与电泳
  abs9226  DTT溶液(1mol/L)  5ml,10ml

  abs9237  2X Laemmli样品缓冲液  5ml*2

  abs9238  10%SDS十二烷基硫酸钠溶液  500ml
  ★★  abs953  2*上样缓冲液 (适用于SDS-PAGE)  10ml
  ★★  abs9301  预制胶 10%,10 wells  5片/盒
  ★★  abs9308  预制胶 10%,15 wells  5片/盒
  ★★  abs9302  预制胶 12%,10 wells  5片/盒
  ★★  abs9309  预制胶 12%,15 wells  5片/盒

  abs9303  预制胶 15% ,10 wells  5片/盒

  abs9310  预制胶 15% ,15 wells  5片/盒

  abs9304  预制胶 4-15%, 10 wells  5片/盒

  abs9311  预制胶 4-15%, 15 wells  5片/盒
  ★★  abs9305  预制胶 4-20%, 10 wells  5片/盒
  ★★  abs9312  预制胶 4-20%, 15 wells  5片/盒

  abs9307  预制胶 8%, 15 wells  5片/盒

  abs9306  预制胶 8-20%, 10 wells  5片/盒

  abs9313  预制胶 8-20%, 15 wells  5片/盒
  NEW  abs9328  3-5kd小分子量预制胶,16.5%,10wells  10片/盒
  NEW  abs9329  3-5kd小分子量预制胶,16.5%,15wells  10片/盒
  ★★★  abs925  蛋白电泳套装  

  abs951  running buffer  100ml,1L
  ★★★★★  abs923  预染蛋白marker, 10-245 KDa  500ul,5*500ul
  ★★★★★  abs924  预染蛋白marker, 10-180 kDa  250ul,2*250ul

  abs966  Genshare考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液  500ml
  ★★★  abs964  考马斯亮蓝染色试剂盒(常规型)R250  1kit

  abs965  考马斯亮蓝染色试剂盒(增强型)G250  1kit
转膜
  abs931  PVDF膜0.2 μm  20张
  ★★  abs932  PVDF膜0.45 μm  20张
  ★★  abs959  NC膜0.2 μm  20张

  abs960  NC膜0.45 μm  20张

  abs950  10*电转液  100ml,1L
封闭
  abs9174  脱脂奶粉  100g,500g
  ★★★★★  abs9155  BSA  50g,100g
一抗孵育  ★★  abs830031  Beta actin antibody   50ul,100ul

  abs132001  Beta actin antibody   50ug,100ug

  abs119680  Beta Actin Polyclonal Antibody  50ul,100ul

  abs132184  Beta-Actin antibody  50ug,100ug

  abs137975  Beta-Actin Mouse Monoclonal Antibody  50ug,100ug
  ★★  abs830030  GAPDH antibody  50ul,100ul

  abs132004  GAPDH antibody  50ug,100ug

  abs137959  GAPDH Mouse Monoclonal Antibody  50ug,100ug

  abs118936  GAPDH Polyclonal Antibody  50ul,100ul

  abs131993  Tubulin alpha Antibody  50ug,100ug
  ★★  abs830032  Tubulin Beta antibody  50ul,100ul

  abs131994  Tubulin beta Antibody  50ug,100ug

  abs125209  Tubulin Beta Polyclonal Antibody  50ul,100ul
二抗孵育  ★★  abs928  Goat anti-mouse IgG-HRP  100ul,500ul,1ml
  ★★  abs20002  Goat anti-rabbit IgG-HRP  100ul,500ul,1ml
  ★★  abs20003  Goat anti-Mouse IgG-FITC  1ml,500ul,100ul
  ★★  abs20004  Goat anti-Rabbit IgG-FITC  100ul,500ul,1ml
  ★★  abs20005  Rabbit anti-Goat IgG-HRP  100ul,500ul,1ml
一抗孵育
  abs830001  Anti- GST  50ul,100ul

  abs830002  Anti- His Tag抗体  50ul,100ul

  abs830003  Anti- His(C-terminal Specific) 抗体  50ul,100ul

  abs830004  Anti- Myc 抗体  50ul,100ul

  abs830005  Anti- DYKDDDDK  50ul,100ul

  abs830006  Anti- HA 抗体  50ul,100ul

  abs830008  Anti-V5,mAb  50ul,100ul

  abs830010  Anti- GST,HRP  50ul

  abs830011  Anti- His Tag (HRP) 抗体  50ul

  abs830012  Anti- His(C-terminal Specific) (HRP) 抗体  50ul

  abs830013  Anti- Myc (HRP) 抗体  50ul

  abs830014  Anti- DYKDDDDK,HRP  50ul

  abs830015  Anti- HA (HRP) 抗体  50ul

  abs830016  Anti- V5 (HRP) 抗体  50ul

  abs137956  C-Myc-Tag Mouse Monoclonal Antibody  50ug,100ug

  abs137958  Flag-Tag Mouse Monoclonal Antibody  50ug,100ug
显色  ★★★★★  abs920   ECL化学发光检测试剂盒  2*25ml,2*50ml,2*250ml

  abs9212  DAB 显色试剂盒(棕黄色,WB)  1kit

  abs9213  DAB 显色试剂盒(紫蓝色,WB)  1kit
其他辅助试剂
  abs952  10*TBST  100ml,1L

  abs9152  Tween-20  500ml
  ★★  abs954  WB专用一抗二抗稀释液  100ml

  abs969  Western一抗二抗去除液(中性)  250ml

  abs968  Western一抗二抗去除液(弱碱性)  250ml

  abs967  Western一抗二抗去除液(强碱性)  250ml
新手必备  ★★★★★  abs926  WB solution base kit(rabbit)  1kit
  ★★★★★  abs927  WB solution base kit(mouse)  1kit
  ★★★★★  abs928  WB solution base kit(goat)  1kit

 

Absin特色产品线:
WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...


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